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Western Blot
Western印跡法（Western Blot）或稱免疫印跡法，常用于科研領域。利用抗體能夠特異性結合對應抗原的原理來對樣品進行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的信息。
原理
Western 印跡法一般先通過PAGE分離蛋白質樣品，再轉移到固相載體（例如硝酸纖維素膜）上，固相載體以非共價形式吸附蛋白質。使用合適的封閉劑封閉固相載體上的空余位置，再使用特異性結合目標蛋白的抗體（一抗）孵育，洗去多余一抗后用標記二抗標記、顯色，達到檢測經電泳分離的目標蛋白成分。其中標記二抗的方法主要有放射性標記、酶聯標記以及熒光標記。
QD-Western
量子點作為新型熒光納米材料，具有熒光效率高、穩定性高、Stockes位移較大、發射光譜窄而對稱、單一波長多色激發等諸多優秀的熒光特性。使用量子點熒光標記產品進行Western印跡實驗（QD-Western），相比于ECL方法或普通熒光染料染色，無需顯色操作便可輕松實現多元檢測，簡化操作，提高了檢測靈敏度。當使用紅色量子點標記二抗時可使用普通凝膠成像儀（常用于觀察DNA溴化乙錠染色）直接成像記錄，更易于實現高靈敏、定量Western印跡檢測。多色檢測時350nnm~450nm波長的紫外燈均可有效激發，使用濾光片或直接使用彩色攝像頭拍攝。
QD-Western印跡實例：
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圖1，A蛋白的QD-Western印跡。 點樣順序左起：大腸桿菌裂菌液、酵母表達上清液、目標A蛋白、表達目標A蛋白的大腸桿菌裂菌液、蛋白Marker，以及1、0.5、0.1、0.02μg的目標A蛋白。上圖為考馬斯亮藍染色的PAGE照片（使用普通凝膠成像儀，白光模式），下圖為相應鼠單抗和QD標記的羊抗鼠二抗（Cat: Q2104/ Q2104a）顯色的結果（使用數碼相機，加裝紅色濾光片）。
結果顯示QD-Western對大腸桿菌裂菌液和酵母表達上清液都沒有非特異性，特異性檢測目標A蛋白。 |
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定制標記服務
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